[Todos] Seminario de Química Orgánica

Sergio M. Bonesi smbonesi en qo.fcen.uba.ar
Jue Mar 29 11:11:52 ART 2007


SEMINARIO DE QUÍMICA ORGÁNICA 

http://www.qo.fcen.uba.ar/Cursos/semin.htm

Miércoles 4 de abril, 13 hs

Aula Dr. Venancio Deulofeu

Departamento de Química Orgánica

Ciudad Universitaria, Pab. II, Piso 3

 

Dr. Pedro F. Aramendía

 

Departamento de Química Inorgánica,

Analítica y Química Física / INQUIMAE. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales,

Universidad de Buenos Aires.

 

Detección de moléculas individuales en películas de PVA por emisión de fluorescencia.

 

 

La detección de moléculas individuales (DMI) por fluorescencia tuvo un gran auge a partir de 1990 impulsada por la secuenciación del ADN. La técnica se extendió rápidamente a estudios de asociación entre macromoléculas biológicas, cambios conformacionales de macromoléculas, difusión en microentornos y dinámica de polímeros amorfos.

Desde el punto de vista básico, la DMI ofrece la posibilidad única de observar la distribución de las variables que se miden y no solamente el valor medio que es el resultado de medidas en los sistemas corrientes de "muchas moléculas".

La diferenciación de la señal de una molécula del ruido de fondo se basa en la excitación repetitiva del fluoróforo. Esto impone restricciones muy severas en cuanto a la estabilidad fotoquímica y a la existencia de estados no emisores de vida larga (tripletes, isómeros, confórmeros, radicales, etc.). La existencia de estados oscuros causa el fenómeno típico de emisión de moléculas individuales conocido como parpadeo (blinking). La densidad de fotones con la que se trabaja y el tiempo de medida necesario se apartan mucho de las condiciones habituales de estudios en sistemas macroscópicos y por eso es importante conocer el desempeño de moléculas bajo las condiciones de irradiación de DMI.

Los estudios de estabilidad fotoquímica se topan muchas veces con dos inconvenientes: el de la elección de la población estadísticamente significativa y el de la diferenciación entre el blanqueo permanente y el reversible.

En este trabajo proponemos soluciones a estos problemas haciendo uso de la iluminación en un campo amplio y detección por medio de cámara CCD de varias moléculas a la vez.
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