[Todos] Seminarios DQIAQF - INQUIMAE, lunes 10 de septiembre - 13 hs.

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Seminarios DQIAQF - INQUIMAE, lunes 10 de septiembre - 13 hs.

Aula de Seminarios INQUIMAE - DQIAQF
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Ciudad Universitaria - Pab. 2  -  Piso 3

*El truncamiento de un barril beta disocia la estabilidad intrínseca de la
propensión a la agregación*

*Lucrecia Curto, Carla Angelani, Inés Cabanas, Julio Caramelo y José María
Delfino*

Departamento de Química Biológica e IQUIFIB (UBA-CONICET),
Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA.
delfino en qb.ffyb.uba.ar

La digestión controlada de la proteína ligadora de ácidos grasos IFABP
rinde dos variantes abreviadas D98D y D78D. Estas estructuras resultan
útiles para investigar aquellos determinantes relacionados con la
agregación de proteínas de la clase barril beta. Aunque dotadas de una
mayor plasticidad conformacional, estas variantes exhiben una topología
característica del estado nativo y son capaces de sustentar una conducta
cooperativa del plegado. Notablemente, aunque IFABP y D98D son monómeros en
solución, D78D adopta una estructura dimérica estable. A pesar del hecho de
que las proteínas beta naturales evitan la agregación por los bordes, el
agregado de co-solventes estructurantes como el 2,2,2-trifluoroetanol (TFE)
induce cambios conformacionales en estas variantes que disparan el proceso
de agregación. En todos los casos, las medidas de turbidez revelan un valor
máximo alrededor de 25% v/v. Además, la tinción de los agregados con los
colorantes Rojo Congo y Tioflavina T sugiere un carácter del tipo amiloide,
hecho consistente con la interpretación de imágenes de microscopía
electrónica de transmisión (TEM) que no excluyen la morfología fibrilar.
Por otro lado, los efectos sustanciales sobre la conformación proteica
global dependientes de la concentración de TFE fueron evaluados por emisión
de fluorescencia y dicroismo circular. El fenómeno de agregación de las
tres construcciones ensayadas obedece a un mecanismo común de
nucleación-elongación, mediante el cual ocurre la formación inicial de
núcleos estables de estequiometría definida a partir del estado nativo como
paso previo al crecimiento de los agregados por aposición de más proteína
nativa. Inesperadamente, la estabilidad conformacional intrínseca de estos
polipéptidos no se correlaciona con la tendencia demostrada a la
agregación. Estos hallazgos confrontan la noción establecida sobre que una
perturbación de la estructura nativa compacta deba necesariamente favorecer
la población de especies propensas a la agregación.